歡迎來訪成都杰瑞思科技有限公司
  • 18081158625
  • 四川省成都市溫江區(qū)蓉臺大道北段388號A棟

PCR實驗室建設所產生的污染源主要有哪些?

建設指南

PCR實驗室建設所產生的污染源主要有哪些?

PCR實驗室屬于三級生物安全實驗室,其產生的污染源主要有哪些?你了解多少,一起來看看吧。

PCR實驗室常見污染物有以下五種:(1)臨床樣本中含有大量待測微生物;(2)通過科學研究獲得質??寺?;(3)以前分析研究的特定微生物;(4)實驗環(huán)境中含有大量特殊微生物;(5)前期擴增產品的殘留污染。

在 PCR實驗室,這也是最容易產生假陽性的污染物。通常,一個典型的 PCR反應可以生成10^9個重復的序列,這樣一個 PCR反應就可以產生10^9個重復的序列,在氣溶膠中,即使是最小的氣溶膠,也可以得到10^6的擴增產物。如果不加以控制,氣溶膠化反應物在短期內會污染實驗室試劑,
儀表與通風系統(tǒng)會造成嚴重的實驗室污染,并產生大量假陽性結果。RNA擴增技術,如 NASBA (NASBA),轉錄介導擴增。
不容易產生擴增產物(TMA)、 Qbeta復制酶等,其擴增產物為 RNA,在環(huán)境中快速降解。PCR實驗室建設所產生的污染源主要有哪些?插圖

2.污染預防措施
(1)嚴格劃分實驗室,嚴格遵守
試驗室分為試劑準備區(qū)、樣品預制區(qū)、 PCR擴增區(qū)、產物分析區(qū)等,并配備相應的儀器設備、工作服、手套、取樣裝置和通風系統(tǒng)。內部區(qū)域
必須直接在各自地區(qū)組裝或包裝使用試劑和廢物。操作者必須小心防止從污染區(qū),包括頭發(fā)、眼睛和衣服等被帶入清潔區(qū)域。

(2)化學清理
試驗臺面上可用10%次氯酸鈉(漂白劑)清洗,再用70%乙醇或清水洗去次氯酸鈉。次氯酸鈉可以氧化損傷核酸,因此可以停留在試驗臺表面
分散的產物被摧毀。結果表明,次氯酸鈉對提取的 DNA和 PCR擴增產物均無法區(qū)分,而用次氯酸鈉處理的樣品無法進行核酸擴增檢測。實際上,某些項目的實際比率
如果需要進入反應管的圓盤需要從污染區(qū)轉到清潔區(qū),需要用2-10%次氯酸鈉溶液浸泡一夜,然后充分沖洗。

(3)擴展產品改性
臨床 PCR檢測通常包括3~4個步驟:制備核酸提取和擴增檢測試劑。樣品處理是一種提取目標核酸、 PCR擴增、產物擴增等技術,是一種新的檢測方法。PCR方法同時進行 PCR擴增和擴增產物分析。
對以前的擴增產物進行適當的修飾,新的擴增檢測應該能被排除,但是為了保證擴增檢測不會影響靶核酸,我們必須遵循兩個基本原則:
產物經修飾后,可與擴增反應管進行修飾,并可與擴增反應管相區(qū)別,但不影響擴增產物序列。
前處理:紫外光照射,酶處理。
修復:補骨脂素、異補骨脂素、鹽酸羥胺、引物水解等。

成都杰瑞思專注于整體實驗室建設與設計,歡迎選擇我們。